ivan 发表于 2007-6-10 14:32

酶联法与金标法的区别

请问一下医生:酶联法与金标法在测试准确率,操作时间等一系列的区别是什么?谢谢医生!

WECOME 发表于 2007-6-10 15:13

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金标法 假阳多因为灵敏度高试剂不是很稳定,酶联灵敏度和金标差不多,但时稳定性高假阳少,一般4-6周论都是已酶联检测为依据,我更倾向酶联检测我认为准确些,这些是我这段时间学习到的我也是恐友,我不是版主和医生我说的对不对还要请版主和医生来回答吧

健康QQ 发表于 2007-6-10 16:54

回复:酶联法与金标法的区别

酶联的原理是在包被板上包被抗原后,通过抗原抗体反应使酶标抗体结合到载体上,经洗涤使结合的酶标抗体和游离的酶标抗体分离,洗去游离的酶标抗体,加入底物显色,根据颜色深浅进行定性或定量分析。(就是把抗原固定在板上,然后加血清,如果有感染就形成抗原抗体结合物,再加酶标抗原,形成抗原抗体抗原复合物,加显色剂显色)

    金标法原理是将特异的抗体先固定于硝酸纤维膜的某一区带,当该干燥的硝酸纤维素膜一端浸入样品(尿液)后,由于毛细管作用,样品将沿着该膜向前移动,当移动至固定有抗体的区域时,样品中相应的抗原即与该抗体发生特异性结合,若用免疫胶体金可使该区域显示一定的颜色,从而实现特异性的免疫诊断。

该技术与以往常规诊断方法相比具有以下突出优点:

快速:全部检测过程仅需 3-20分钟。
简便:不需其它任何仪器设备,操作也极其简单,可随时随地进行。
可单份检测:对标本既能成批检测,又可单份检测,患者可立刻拿到结果,不
必等待。
稳定性好:金标试剂稳定,可长期保存。
检测标本种类多:既可用于查血,又可用于检尿或唾液,因而适合各种人群的检查。

在现在医学技术进步下,两者准确性无明显差别,不管那种方法得出的检测结果,你都可以放心。

健康QQ 发表于 2007-6-10 17:01

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原帖由 WECOME 于 2007-6-10 15:13:19 发表
金标法 假阳多因为灵敏度高试剂不是很稳定,酶联灵敏度和金标差不多,但时稳定性高假阳少,一般4-6周论都是已酶联检测为依据,我更倾向酶联检测我认为准确些,这些是我这段时间学习到的我也是恐友,我不是版主和医生......


你这观点是不对的,实际上现在的医学技术进步很快,两者差别不大,国家都在基层单位大力推行快速检测HIV抗体,很多快速检测实验室就是使用金标试纸为主。

20100222 发表于 2010-3-7 22:30

请问网上卖的雅培是几代的?哪种类型的?

wawdj 发表于 2010-4-6 12:10

godisgreed 发表于 2010-4-12 21:24

dddddddddddddd

丢了幸福的猪 发表于 2010-6-8 11:39

我在医院做的有3次都是快速。1次酶

补偿 发表于 2010-6-21 08:20

请问专家,我化验单上参考值和结果两项都只有简单的---阴性 连个字,这是什么方法呢?

项目   参考值   结果
HIV      阴性       阴性


还有,关于现在医院的输血前五项中的hiv检查

如果人是处于急性感染期,则无法测出是否感染

那么输血前五项对于安全的输血还有用吗?


请专家解答!

lmcj 发表于 2010-7-19 21:07

摘要】目的:对比分析四种方法筛查HIV抗体的检测结果,探索最佳初筛实验方法。方法:用四种方法同时检测我区556例住院患者和HIV自愿咨询检测人员血清并对阳性对照系列稀释血清同时检测。结果:硒标法假阳性率高,敏感性及特异性均低于其它三种方法;PA(明胶颗粒凝集试验)法有较高的灵敏度;ELISA(酶联免疫吸附试验)法第3代、第4代试剂敏感性、特异性均很高。结论:ELISA第3代试剂(双抗原夹心法)仍是实验室进行HIV抗体初筛的首选方法。

【关键词】HIV抗体筛查 ELISA PA 硒标法

艾滋病是全人类所面临的最具有毁灭性的疾病。目前,我国艾滋病流行已经进入快速发展阶段,全国各艾滋病初筛实验室进行HIV抗体初筛的任务繁重而艰巨,各种初筛方法间存在敏感性和特异性的差异。笔者尝试用四种方法对两种样本同时检测HIV抗体并对结果进行分析,现报道如下。

  1材料与方法

  1.1样本来源

  来自2006年6月至2007年底我院住院患者及VCT(自愿咨询检测)人员,共556例,静脉采血离心取血清;阳性标本A为筛查阳性后经市疾控中心确认阳性的标本;B为金豪试剂盒(ELISA 3代)阳性对照。将A、B用正常人血清系列稀释。

  1.2试剂

  HIV1/2硒标法为美国雅培公司生产;明胶颗粒凝集法为日本伯乐富士瑞必欧株式会社生产;HIV1/2 ELISA第3代双抗原夹心法试剂盒为北京金豪有限公司生产; HIV1/2 ELISA第4代试剂盒为荷兰生物梅里埃公司生产。各试剂均在有效期内使用。

  1.3方法

  同时用四种方法对556例样本(患者及VCT者)进行检测;将阳性血清按1∶5、1∶10、1∶20、1∶40、1∶80、1∶160稀释,用四种方法同时检测。所有操作程序及结果判读均严格按照各试剂说明书进行。阳性者复检阳性送市疾控中心确认。

  2结果

  2.1四种方法同时检测556例样本(患者及VCT)结果

  见表1。其中1例确认阳性为四种方法同时检出的同一阳性标本。表1四种方法筛查556份样本结果比较(略)

  2.2四种方法对不同稀释度阳性标本检测结果

  见表2。结果显示:四种方法灵敏度由高到低依次为PA法、ELISA 3代、ELISA 4代、硒标法。表2四种方法对不同稀释度阳性标本检测结果(略) 注:A为经确认为阳性的标本血清,B金豪试剂盒阳性对照血清。

  3讨论

    我国目前最常用的抗体筛查试验是酶联免疫吸附试验(ELISA)、明胶颗粒凝集试验(PA)和胶体硒(金)标记法。

  3.1硒(金)标记法

  是以胶体硒(金)为标记物,以硝酸纤维素膜为载体,以层析形式进行免疫测定的技术。其特点是比较稳定,操作简单快速,不需仪器设备,适用于基层单份标本。但该方法诊断特异性低于其他方法,假阳性率高(见表1)。灵敏度也低于其他方法(见表2)。国际上也有报道称该试剂灵敏度低,美国等西方国家不允许其用于献血员的筛查[1]。

  3.2明胶颗粒凝集试验

  是使用明胶颗粒吸附HIV抗原,检测被筛查品中 HIV1/2抗体。该方法也不需仪器设备,其灵敏度高于ELISA法。其定量分析HIV抗体几何平均滴度高于ELISA第3代、第4代试剂[2]。但实验中需要U板,需按要求对样本进行稀释,因此不利于基层卫生单位初筛使用。可用于各实验室初筛阳性后复检时检测抗体滴度。

  3.3ELISA法

  初筛用的ELISA试剂经过了第1代、第2代、第3代后已经发展到了第4代。第3代、第4代试剂的敏感性、特异性已达到国际水平[3]。第3代 HIV1/2 试剂盒(双抗原夹心法),采用基因工程包被HIV1gp41和HIV2gp 36特异性抗原,不用酶标二抗,而用酶标特异HIV抗原,双重识别,不易出现假阳性,能同时检出IgM、IgG,防止漏检。ELISA第4代在第3代基础上同时包被HIV多种抗体和HIV1p24抗原,酶结合物中含有相应HRP标记的抗原和抗体,可同时检测HIV抗体和 HIV1p24抗原,提高了检测敏感性,缩短了窗口期。ELISA第4代比第3代可提前1周~2周作出诊断,适用于早期感染者筛查。但由于包被的抗体占据一定抗原位点,尤其是当抗原消失、抗体大量出现时第4代试剂的敏感度低于第3代[2]。本实验也证实ELISA第3代试剂敏感性优于第4代。

    综上所述,四种方法用于HIV抗体初筛上各有优缺点,而ELISA第3代试剂仍然是各初筛实验室首选初筛方法
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