酶联法与金标法的区别

ivan · 发表于 2007-6-10 14:32

请问一下医生：酶联法与金标法在测试准确率，操作时间等一系列的区别是什么？谢谢医生！

WECOME · 发表于 2007-6-10 15:13

金标法假阳多因为灵敏度高试剂不是很稳定，酶联灵敏度和金标差不多，但时稳定性高假阳少，一般4-6周论都是已酶联检测为依据，我更倾向酶联检测我认为准确些，这些是我这段时间学习到的我也是恐友，我不是版主和医生我说的对不对还要请版主和医生来回答吧

健康QQ · 发表于 2007-6-10 16:54

酶联的原理是在包被板上包被抗原后，通过抗原抗体反应使酶标抗体结合到载体上，经洗涤使结合的酶标抗体和游离的酶标抗体分离，洗去游离的酶标抗体，加入底物显色，根据颜色深浅进行定性或定量分析。（就是把抗原固定在板上，然后加血清，如果有感染就形成抗原抗体结合物，再加酶标抗原，形成抗原抗体抗原复合物，加显色剂显色）

金标法原理是将特异的抗体先固定于硝酸纤维膜的某一区带，当该干燥的硝酸纤维素膜一端浸入样品(尿液)后，由于毛细管作用，样品将沿着该膜向前移动，当移动至固定有抗体的区域时，样品中相应的抗原即与该抗体发生特异性结合，若用免疫胶体金可使该区域显示一定的颜色，从而实现特异性的免疫诊断。

该技术与以往常规诊断方法相比具有以下突出优点：

快速：全部检测过程仅需 3-20分钟。
简便：不需其它任何仪器设备，操作也极其简单，可随时随地进行。
可单份检测：对标本既能成批检测，又可单份检测，患者可立刻拿到结果，不
必等待。
稳定性好：金标试剂稳定，可长期保存。
检测标本种类多：既可用于查血，又可用于检尿或唾液，因而适合各种人群的检查。

在现在医学技术进步下，两者准确性无明显差别，不管那种方法得出的检测结果，你都可以放心。

健康QQ · 发表于 2007-6-10 17:01

原帖由 WECOME 于 2007-6-10 15:13:19 发表
金标法假阳多因为灵敏度高试剂不是很稳定，酶联灵敏度和金标差不多，但时稳定性高假阳少，一般4-6周论都是已酶联检测为依据，我更倾向酶联检测我认为准确些，这些是我这段时间学习到的我也是恐友，我不是版主和医生......

你这观点是不对的，实际上现在的医学技术进步很快，两者差别不大，国家都在基层单位大力推行快速检测HIV抗体，很多快速检测实验室就是使用金标试纸为主。

20100222 · 发表于 2010-3-7 22:30

请问网上卖的雅培是几代的？哪种类型的？

wawdj · 发表于 2010-4-6 12:10

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godisgreed · 发表于 2010-4-12 21:24

dddddddddddddd

丢了幸福的猪 · 发表于 2010-6-8 11:39

我在医院做的有3次都是快速。1次酶

补偿 · 发表于 2010-6-21 08:20

请问专家，我化验单上参考值和结果两项都只有简单的---阴性连个字，这是什么方法呢？

项目参考值结果
HIV 阴性阴性

还有，关于现在医院的输血前五项中的hiv检查

如果人是处于急性感染期，则无法测出是否感染

那么输血前五项对于安全的输血还有用吗？

请专家解答！

lmcj · 发表于 2010-7-19 21:07

摘要】  目的：对比分析四种方法筛查HIV抗体的检测结果，探索最佳初筛实验方法。方法：用四种方法同时检测我区556例住院患者和HIV自愿咨询检测人员血清并对阳性对照系列稀释血清同时检测。结果：硒标法假阳性率高，敏感性及特异性均低于其它三种方法；PA（明胶颗粒凝集试验）法有较高的灵敏度；ELISA（酶联免疫吸附试验）法第3代、第4代试剂敏感性、特异性均很高。结论：ELISA第3代试剂（双抗原夹心法）仍是实验室进行HIV抗体初筛的首选方法。

【关键词】  HIV抗体筛查 ELISA PA 硒标法

艾滋病是全人类所面临的最具有毁灭性的疾病。目前，我国艾滋病流行已经进入快速发展阶段，全国各艾滋病初筛实验室进行HIV抗体初筛的任务繁重而艰巨，各种初筛方法间存在敏感性和特异性的差异。笔者尝试用四种方法对两种样本同时检测HIV抗体并对结果进行分析，现报道如下。

　　１  材料与方法

　　1．1  样本来源

　　来自2006年6月至2007年底我院住院患者及VCT（自愿咨询检测）人员，共556例，静脉采血离心取血清；阳性标本A为筛查阳性后经市疾控中心确认阳性的标本；B为金豪试剂盒（ELISA 3代）阳性对照。将A、B用正常人血清系列稀释。

　　1．2  试剂

　　HIV1/2硒标法为美国雅培公司生产；明胶颗粒凝集法为日本伯乐富士瑞必欧株式会社生产；HIV1/2 ELISA第3代双抗原夹心法试剂盒为北京金豪有限公司生产； HIV1/2 ELISA第4代试剂盒为荷兰生物梅里埃公司生产。各试剂均在有效期内使用。

　　1．3  方法

　　同时用四种方法对556例样本（患者及VCT者）进行检测；将阳性血清按1∶5、1∶10、1∶20、1∶40、1∶80、1∶160稀释，用四种方法同时检测。所有操作程序及结果判读均严格按照各试剂说明书进行。阳性者复检阳性送市疾控中心确认。

　　2  结果

　　2．1  四种方法同时检测556例样本（患者及VCT）结果

　　见表1。其中1例确认阳性为四种方法同时检出的同一阳性标本。表1  四种方法筛查556份样本结果比较（略）

　　2．2  四种方法对不同稀释度阳性标本检测结果

　　见表2。结果显示：四种方法灵敏度由高到低依次为PA法、ELISA 3代、ELISA 4代、硒标法。表2  四种方法对不同稀释度阳性标本检测结果（略）注：A为经确认为阳性的标本血清，B金豪试剂盒阳性对照血清。

　　3  讨论

我国目前最常用的抗体筛查试验是酶联免疫吸附试验(ELISA)、明胶颗粒凝集试验(PA)和胶体硒（金）标记法。

　　3．1  硒（金）标记法

　　是以胶体硒（金）为标记物，以硝酸纤维素膜为载体，以层析形式进行免疫测定的技术。其特点是比较稳定，操作简单快速，不需仪器设备，适用于基层单份标本。但该方法诊断特异性低于其他方法，假阳性率高（见表1）。灵敏度也低于其他方法（见表2）。国际上也有报道称该试剂灵敏度低，美国等西方国家不允许其用于献血员的筛查［1］。

　　3．2  明胶颗粒凝集试验

　　是使用明胶颗粒吸附HIV抗原，检测被筛查品中 HIV1/2抗体。该方法也不需仪器设备，其灵敏度高于ELISA法。其定量分析HIV抗体几何平均滴度高于ELISA第3代、第4代试剂［2］。但实验中需要U板，需按要求对样本进行稀释，因此不利于基层卫生单位初筛使用。可用于各实验室初筛阳性后复检时检测抗体滴度。

　　3．3  ELISA法

　　初筛用的ELISA试剂经过了第1代、第2代、第3代后已经发展到了第4代。第3代、第4代试剂的敏感性、特异性已达到国际水平［3］。第3代 HIV1/2 试剂盒（双抗原夹心法），采用基因工程包被HIV1gp41和HIV2gp 36特异性抗原，不用酶标二抗，而用酶标特异HIV抗原，双重识别，不易出现假阳性，能同时检出IgM、IgG，防止漏检。ELISA第4代在第3代基础上同时包被HIV多种抗体和HIV1p24抗原，酶结合物中含有相应HRP标记的抗原和抗体，可同时检测HIV抗体和 HIV1p24抗原，提高了检测敏感性，缩短了窗口期。ELISA第4代比第3代可提前1周～2周作出诊断，适用于早期感染者筛查。但由于包被的抗体占据一定抗原位点，尤其是当抗原消失、抗体大量出现时第4代试剂的敏感度低于第3代［2］。本实验也证实ELISA第3代试剂敏感性优于第4代。

综上所述，四种方法用于HIV抗体初筛上各有优缺点，而ELISA第3代试剂仍然是各初筛实验室首选初筛方法

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wawdj wawdj 当前离线积分 18 IP卡狗仔卡头像被屏蔽	发表于 2010-4-6 12:10 \| 显示全部楼层提示: 作者被禁止或删除内容自动屏蔽
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