典型的HIV-l WB结果应包括以下条带:p17、p24、p31、p39、gp41、p51、p55、p66和gpl20/gpl60。大多数国际组织的阳性判断标准应至少包括一条Env条带(gp41和gpl20/gpl60)和一条Gag条带(p17、p24和p55),或一条Env条带和一条Pol条带(p31、p51和p66)。如果wB检测结果中有条带出现但不满足阳性判定标准,则将结果记为不确定,产生WB不确定(West|ern blot indeterminate,wBi)结果的原因是多方面的,主要包括样品的原因、试剂的原因和操作的原因等。
(一)样品的原因
虽然产生wBi结果的原因是多方面的,但wBi结果也是病毒蛋白与受试样品反应或交叉反应的结果,因此,受试个体的血清学特征是产生wBi的一个主要原因。在排除了试剂和操作方面的原因后,产生wBi结果的个体可能有HIV或其他逆转录病毒的暴露史,或罹患其他疾病。
HIV感染的不同时期,感染者体内抗体类型及水平是不断变化的,这是产生wgi结果的一个主要原因。HIV感染的急性期,感染者体内抗体水平较低,针对HIV不同抗原的抗体没有完全出现,此情况下的WB检测易出现不确定结果,但随着病程的进展,wB检测也逐渐能将其判定为阳性(Celum et a1.,1991;Dock et a1.,1988);AIDS病晚期,机体免疫系统被破坏,血清中抗体水平极低,wB检测易出现不确定结果(Biggar。et aI.,1985);如果用HIV-l WB试剂检测HIV-2感染者样品,易出现不确定结果(Dock et a1.,1988);Georgoulias等人的研究发现,低危人群献血员WB检测的不确定结果可能提示其为顿挫性感染(abortive infection);感染基因缺失株HIV的个体,其wB检测易出现不确定结果(Rhodes et a1.,1999);Kopko等人的研究发现,静默感染(immunosilent infection)个体的WB检测也易出现不确定结果,此情况下,往往只出现一条抗gpl60的条带,而不出现最常见的抗一核心蛋白条带(p24);此外,不同型或亚型HIV的混合感染的个体,或HIV与SIV(猴免疫缺陷病毒)混合感染的个体,其wB检测结果也易出现不确定结果(Schaefer et a1.,2005)。
HIV与其他的逆转录病毒有一定的同源性,感染这类逆转录病毒可能会产生与HIV有交叉反应的抗体,因此有些wBi结果的产生可能与感染其他逆转录病毒有关,如人类T细胞白血病病毒(human T-cell leykemia virus,HTLV)(Dock et a1.,1988)、山羊关节炎-脑炎病毒(caprine arthritis-encephalitis virus,CAEV)(Tesoro-Cruz et a1.,2003)等。
除逆转录病毒感染外,患有某些特定疾病的个体HIV wB检测也容易出现不确定结果。研究表明,自身免疫病患者如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、自身免疫性溶血性贫血、原发性血小板减少性紫癜、多发性硬化症、干燥综合征、重症肌无力,恶性肿瘤患者如慢性淋巴细胞白血病、乳腺癌、肺癌、结肠癌、霍奇金病、多发性骨髓瘤,以及泌尿系统疾病患者如急性肾小球肾炎、急性肾小管坏死、急性肾功能衰竭、慢性肾功能衰竭、肾病综合征,其HIV wB检测易出现不确定结果(Urnovitz et a1.,1999)。
上述疾病导致的不确定结果中,HIV条带的出现并不是随机的,而主要是针对核心抗原的条带,特别是p24。这可能有以下几方面原因:①系统性红斑狼疮患者体内的自身抗体可能与p24有交叉反应;②自身免疫病患者体内有针对HIV p24表位的抗体;③抗HLA血清中含有与HIV病毒蛋白有交叉反应的抗体;④分支杆菌细胞壁成分可能与HIV有相同的抗原表位;⑤血液透析患者体内的移植抗原和(或)自身抗体易产生异常的免疫反应(GLlan Ming,2007)。此外Talal等人发现,除上述疾病外,麻风病、高胆红素血症等患者HIV WB检测也易出现不确定结果。
除上述种种情况外,在HIV低流行区的健康献血员人群中也常常能检测到wBi结果,其中有些受试者有未经筛查的血液制品的使用史,有些为HIV阳性母亲的孩子,在各种医疗措施的干预下,这些孩子未感染HIV,其从母亲获得的HIV抗体随时问延长逐渐减弱,其HIV wB检测易出现不确定结果。除上述两种情况外,大多数低流行区健康人群的WBi结果无法用现有的知识来解释。HIV 0型env序列与人类14种不同的染色体有同源性(Urnovitz et a1.,1999);健康人的血清中常常含有针对哺乳动物C型逆转录病毒种间抗原的抗体(Urnovitz and Murphy,1996)。这些内源性的逆转录因子可能是产生wBi结果的部分原因,但还需进一步的研究证实。
(二)试剂的原因
不同批次试剂之间的差异可能是产生WBi结果的一个原因,特别是不同批次试剂检测结果的重复性较差时。当检测程序和检测对象无明显变化,而同种试剂检测的wBi结果发生率突然发生变化时,该试剂可能存在质量问题。导致试剂出现质量问题的原因是多方面的,如材料选择方面的原因、试剂盒优化方面的原因及试剂盒生产方面的原因。如抗原制备时,来源于病毒培养细胞的非病毒蛋白去除不够彻底,掺入的非病毒蛋白可能与待测样品中的抗体发生交叉反应,从而产生wBi结果。此外,判断标准制定的不合理也易产生wBi结果,如20世纪80年代,一份ELISA阳性样品在wB检测中虽只有p52一条带也被定为了阳性,但在后续的随访检测中证明该样品为假阳性,而依据现在的判断标准,此结果应定为不确定(Roy et a1.,1987)。通过对判定标准进行合理修订能有效降低wBi结果的发生率。
怎么这么多啊,a良 淡淡,你就是个人才啊,老是往牛角尖钻,累不累啊,淡淡你肯定没事的。
RE: a良,过来解释一下,丙肝是咋回事儿!
tjm058 发表于 2012-4-24 12:52 static/image/common/back.gif淡淡,你就是个人才啊,老是往牛角尖钻,累不累啊,淡淡你肯定没事的。
不是不是,兄弟,我就是考虑的多点,实在是伤不起啊!谢谢你了兄弟!昨天都有人跟我爆粗口了,唉…… 我知道都是为我好啊! 呵呵,反正我检查是hiv,梅毒,乙肝,丙肝,疱疹,其他不查了 还有个ebv,eb 这些过了其他的就没事了,要得也就是皮肤病了,查不出来的只有发了才知道 皮肤病也就尖锐湿疣凶,其他都是浮云。