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介绍一下地坛的PCR

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发表于 2010-4-20 23:49 | 显示全部楼层 |阅读模式

       地坛医院病毒载量采纳的核酸序列依靠性扩增法-NASBA(Nucleic acidsequence based amplification)先容:
       NASBA是由一对引物介导的、连续均一的、体外特异性核苷酸序列等温扩增RNA的新技术。反响在 42℃进行 ,可在 2h内将RNA模板扩增约 109倍。NASBA原理是提取病毒RNA,加入AMV逆转录酶、RNA酶H、T7RNA聚合酶和引物进行扩增 [16]。整个反响分非循环相和循环相:在非循环相中,引物I与模板RNA退火后在AMV逆转录酶的作用下合成cDNA,形成RNANA杂合体,随即RNaseH降解RNA,引物Ⅱ与cDNA退火, 在反转录酶作用下合成第二条DNA互补链。双链DNA可在T7RNA聚合酶的作用下,经其启动子序列起动而转录RNA,RNA又可在反转录酶的作用下反转录成DNA,进入循环相,对模板进行大量扩增
      地坛PCR可以做到50 COPIES,精度很高。所以价格很高。
     如果赶得巧,第二天就出结果,一般10个工作日就可以了(官方说20工作日,一个月)。
     我做了2次都是阴性,就是<LDL 小于最低检测值。
     如果抗体阴载量小于最低检测值就绝对排除。
     如果有问题,在任何时期,只要过了2周,抗原、抗体、载量不可能同时查不到。
    坐载量最好前几天不要乱吃药、不要喝酒、不要接触一些化学品,载量很灵敏,非常容易出现错误,假阳能把你吓死。
    急性期载量一般是几万-几十万,如果是千、百级别,一般都是假阳。
    心理承受立差的同学千万慎重,我做了2次,吓死了,怕假阳啊。
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发表于 2010-4-20 23:50 | 显示全部楼层
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发表于 2010-4-21 02:07 | 显示全部楼层
请为玉树人民祈福
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