艾滋病( acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(human immunode6ciency virus,HIV)感染引起的严重传染病。自1981年首次确认AIDS以来,全球累计有6500万人感染HIV。近年来,我国发现的HIV感染者和 AIDS患者逐年增加,且有从高危人群向普通人群扩散的趋势。 T淋巴细胞是机体免疫系统内功能最重要的一群细胞,在正常情况下,各淋巴细胞亚群互相作用,维持机体免疫功能的正常,当不同淋巴细胞亚群的数量和功能发生异常时,就可导致机体免疫功能紊乱。为了更好的了解HIV感染者、AIDS患者的免疫状况,本文对正常人与HIV感染者、AIDS患者CD.细胞计数、CDs细胞计数及CD4/CD8比值进行比较,以便更好地进行监测与治疗。 1 资料与方法 1.1 一般资料抽取2010年6月份进行CD4T细胞检测但尚未进行抗病毒治疗的HIV感染者全血样本199份,男182例,女l7例;平均年龄(36±11)岁;其中6份样本因血样本凝固而弃去。抗病毒治疗的AIDS患者样本49份,男43例,女6例;平均年龄(40±11)岁,其中有2份样本因血样本凝固而弃去。 所有病例均经江苏省疾病预防控制中心艾滋病确认实验室证实为抗-HIV-I阳性。AIDS的诊断符合中华医学会和卫生部联合颁布的《艾滋病诊疗指南》中的标准。正常对照样本取自我院体检正常的工作人员,共43份,其中男19例,女24例;平均年龄(38±l0)岁。所有样本应用EDTA-K2抗凝真空管采集静脉血3 ~5 ml,于采血后8h内送抵实验室进行检测。 1.2 检测仪器与试剂采用美国BD公司FACScalibur流式细胞仪及配套试剂进行T淋巴细胞绝对计数。 1.3 检测方法严格按《全国艾滋病检测技术规范》操作。使用BD MultiTEST CD3-FITC/CD8-PE/CD45PercP/CD.APC抗体(美国BD公司)和含有已知数量标准微球的TruCOUNT管(美国BD公司)。在TruCOUNT管中加入20ul MultiTEST CD3-FITC/CD8-PE/CD45PerCP/CD4 APC抗体和50ul抗凝血,充分混匀,室温暗处反应15 min后,加入450ul FACS溶血紊(美国BD公司),充分混匀,室温暗处反应15 min后上流式细胞仪分析。应用CaliBRITETM磁珠及FACSCompTM软件校准仪器,MultiSETTM软件获取及自动分析检测结果。 1.4 统计学分析应用SPSS 11.5统计软件,计量资料以xts表示,两两比较采用t检验,P <0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 3组CD4细胞计数结果正常组与患者组,正常组与感染组CD4细胞计数差异有统计学意义,患者组、感染组CD4细胞计数显着低于正常组(P<0.05),患者组与感染组CD4细胞计数差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。 表1 3组CD4细胞计数 2.2 3组CD8计数结果正常组与患者组、正常组与感染组CD8细胞计数差异有统计学意义(P<0.05),患者组、感染组CD.细胞计数显着高于正常组(P<0.05),患者组与感染组CD8细胞计数差异无统计学意义(P>0.05)。见表2 表2 3组CD8细胞计数 CD4/CD8比值差异有统计学意义(P<0.05),患者组、感染缉CD4/CD8比值显着低于正常组(P<0.05),患者组与感染组CD4/CD8比值差异无统计学意义(P>0.05)。见表3 表3 3组CD4/CD8比值 3 讨论 正常情况下,各淋巴细胞亚群互相作用,维持机体免疫功能的正常,当不同淋巴细胞亚群的数量和功能发生异常时,可导致机体免疫功能紊乱。T淋巴细胞是机体免疫系统内功能最重要的一群淋巴细胞,主要由CD4和CD8两群细胞组成。 HIV感染后,90%的HIV感染者经8-l0年进入AIDS期,疾病呈现典型进展状态。HIV感染可以活化T细胞免疫,对病毒有一定的抑制作用,但病毒不能完全被清除,因而导致持续性感染,HIV侵入人体后,主要感染有CD4分子标记的T淋巴细胞,在其胞内复制、繁衍并破坏细胞,随着病程的进展,使得该种细胞数量进行性下降,主要表现为CD4细胞逐渐被耗竭所致的细胞免疫功能低下,引起机体免疫功能全面障碍,导致整个机体免疫功能持续紊乱,随着病情的进展,CD4细胞逐渐减少乃至完全耗竭。 HIV感染在造成CD4细胞明显下降的同时还造成明显的CD8细胞的变化,主要表现为CD8细胞数量的增加,这种增加在CD4细胞下降之后已经出现,CD57+、HIA-DR、CD38、CD45与RO阳性的CDs细胞在HIV感染中均明显上升,并与病程相关。研究证实,CD8细胞对感染HIV CD4细胞的抑制作用不仅依赖于CTL,而且CD8细胞还分泌细胞因子IL16和化学因子MIP-la、1b、RANTES、MDC等来显着降低HIV病毒发生。感染HIV后的无症状携带期CD8细胞保持强的抑制HIV复制活性,而有症状AIDS期这种活性减弱,从而促进病情的发展。从以上我们可以分析有症状AIDS期CD8细胞数比无症状携带期少,从而CD8细胞抑制HIV复制的活性较低,造成HⅣ复制增多,HIV破坏CD4细胞的能力增强,CD4细胞减低,所以CD4细胞与CD8细胞数呈正相关。外周血中CD4T淋巴细胞的绝对值对于HIV感染状况,疾病分期,预测其机会性感染的可能性和评价治疗效果具有极其重要作用。CD8为抑制性T淋巴细胞,在控制HIV复制中起重要作用。CD4/CD8比值反映HIV疾病状况,可作为评价疾病进展的重要指标之一。因此CD3、CD4 T淋巴细胞计数是作为直接测定免疫功能的方法,也是反映HIV感染者免疫系统损害状况最明确的指标。 为了更好的了解HIV感染者、AIDS患者的免疫状况,我们对其与正常人之间的CD4细胞计数、CD8细胞计数、CD4/CD8比值进行比较。研究结果显示HIV感染者、AIDS患者的CD4细胞计数、CD4/CD8比值显着低于正常人,与前期文献报道一致。而HIV感染者与AIDS患者相比,CD4细胞计数、CD8细胞计数、CD4/CD8比值差异无统计学意义(P>0.05),与前期文献报道不同,有关感染者与患者之间的免疫机制变化,还有待进一步的研究。
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