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摘要】目的：对比分析四种方法筛查HIV抗体的检测结果，探索最佳初筛实验方法。方法：用四种方法同时检测我区556例住院患者和HIV自愿咨询检测人员血清并对阳性对照系列稀释血清同时检测。结果：硒标法假阳性率高，敏感性及特异性均低于其它三种方法；PA（明胶颗粒凝集试验）法有较高的灵敏度；ELISA（酶联免疫吸附试验）法第3代、第4代试剂敏感性、特异性均很高。结论：ELISA第3代试剂（双抗原夹心法）仍是实验室进行HIV抗体初筛的首选方法。
【关键词】HIV抗体筛查 ELISA PA 硒标法
艾滋病是全人类所面临的最具有毁灭性的疾病。目前，我国艾滋病流行已经进入快速发展阶段，全国各艾滋病初筛实验室进行HIV抗体初筛的任务繁重而艰巨，各种初筛方法间存在敏感性和特异性的差异。笔者尝试用四种方法对两种样本同时检测HIV抗体并对结果进行分析，现报道如下。
１材料与方法
1．1样本来源
来自2006年6月至2007年底我院住院患者及VCT（自愿咨询检测）人员，共556例，静脉采血离心取血清；阳性标本A为筛查阳性后经市疾控中心确认阳性的标本；B为金豪试剂盒（ELISA 3代）阳性对照。将A、B用正常人血清系列稀释。
1．2试剂
HIV1/2硒标法为美国雅培公司生产；明胶颗粒凝集法为日本伯乐富士瑞必欧株式会社生产；HIV1/2 ELISA第3代双抗原夹心法试剂盒为北京金豪有限公司生产； HIV1/2 ELISA第4代试剂盒为荷兰生物梅里埃公司生产。各试剂均在有效期内使用。
1．3方法
同时用四种方法对556例样本（患者及VCT者）进行检测；将阳性血清按1∶5、1∶10、1∶20、1∶40、1∶80、1∶160稀释，用四种方法同时检测。所有操作程序及结果判读均严格按照各试剂说明书进行。阳性者复检阳性送市疾控中心确认。
2结果
2．1四种方法同时检测556例样本（患者及VCT）结果
见表1。其中1例确认阳性为四种方法同时检出的同一阳性标本。表1四种方法筛查556份样本结果比较（略）
2．2四种方法对不同稀释度阳性标本检测结果
见表2。结果显示：四种方法灵敏度由高到低依次为PA法、ELISA 3代、ELISA 4代、硒标法。表2四种方法对不同稀释度阳性标本检测结果（略） 注：A为经确认为阳性的标本血清，B金豪试剂盒阳性对照血清。
3讨论
我国目前最常用的抗体筛查试验是酶联免疫吸附试验(ELISA)、明胶颗粒凝集试验(PA)和胶体硒（金）标记法。
3．1硒（金）标记法
是以胶体硒（金）为标记物，以硝酸纤维素膜为载体，以层析形式进行免疫测定的技术。其特点是比较稳定，操作简单快速，不需仪器设备，适用于基层单份标本。但该方法诊断特异性低于其他方法，假阳性率高（见表1）。灵敏度也低于其他方法（见表2）。国际上也有报道称该试剂灵敏度低，美国等西方国家不允许其用于献血员的筛查［1］。
3．2明胶颗粒凝集试验
是使用明胶颗粒吸附HIV抗原，检测被筛查品中 HIV1/2抗体。该方法也不需仪器设备，其灵敏度高于ELISA法。其定量分析HIV抗体几何平均滴度高于ELISA第3代、第4代试剂［2］。但实验中需要U板，需按要求对样本进行稀释，因此不利于基层卫生单位初筛使用。可用于各实验室初筛阳性后复检时检测抗体滴度。
3．3ELISA法
初筛用的ELISA试剂经过了第1代、第2代、第3代后已经发展到了第4代。第3代、第4代试剂的敏感性、特异性已达到国际水平［3］。第3代 HIV1/2 试剂盒（双抗原夹心法），采用基因工程包被HIV1gp41和HIV2gp 36特异性抗原，不用酶标二抗，而用酶标特异HIV抗原，双重识别，不易出现假阳性，能同时检出IgM、IgG，防止漏检。ELISA第4代在第3代基础上同时包被HIV多种抗体和HIV1p24抗原，酶结合物中含有相应HRP标记的抗原和抗体，可同时检测HIV抗体和 HIV1p24抗原，提高了检测敏感性，缩短了窗口期。ELISA第4代比第3代可提前1周～2周作出诊断，适用于早期感染者筛查。但由于包被的抗体占据一定抗原位点，尤其是当抗原消失、抗体大量出现时第4代试剂的敏感度低于第3代［2］。本实验也证实ELISA第3代试剂敏感性优于第4代。
综上所述，四种方法用于HIV抗体初筛上各有优缺点，而ELISA第3代试剂仍然是各初筛实验室首选初筛方法
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回复 6# 仁心仁术
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