TPPA、TPAB及TRUST三种方法对梅毒的诊断和监控意义（文献）
我们对2009年1~6月我院门诊和住院病人要求查梅毒项目者共计576例进行研究。用TPAB(ELISA)和TPPA法对病人进行梅毒检测,用TRUST法测定其滴度,以探讨TPPA、TRUST和TPAB(ELISA)联合检测对梅毒病人的诊断及监控意义。1 对象与方法
1. 1 对象
本组要求查梅毒项目者共计576例,选取ELISA和TPPA 2种方法同时检测,TRUST将阳性样本进一步测定。三种方法检测中有1种为阳性即认为初筛阳性的样本共144例。
1. 2 方法
TPPA试剂(日本富士公司),TRUST试剂(上海荣盛生物技术公司),TPAB(厦门英科新创科技有限公司)。严格按试剂盒说明书操作。仪器为酶标仪(安图anthos2010)和洗板机(BIO-RADModel1575)。
2 结 果
在144例初筛梅毒阳性标本中,TRUST纸板法检出阳性56例, ELISA检出阳性143例,TPPA确认阳性142例,见表1。从表1中可看出,与TPPA确认试验相比较, TRUST方法灵敏度仅为39. 44% (56/142), 假阳性率1. 79% (1/56),漏检率60. 56% (86/142); 而ELISA方法灵敏度为99.30% (141/142),假阳性率为1. 40% (2/143),漏检率0. 70% (1/142)。
表1 144例阳性标本3种试剂检测结果(n)
TPPA TRUST TPAB(ELISA)
阳性 142 56 143
阴性 2 86 1
假阳性 0 1 2
假阴性 0 86 1
3 讨 论
梅毒是苍白螺旋体引起的性传播性疾病,主要是通过性接触传播,但也可经输血感染、胎儿垂直传播。因此,检测梅毒螺旋体抗体是预防经输血传染性病的重要手段之一。目前检测方法较多,TPPA的梅毒螺旋体抗原经过高度纯化消除试验中的生物学假阳性,能提高实验的特异,被广泛采用。我们采用TPPA作为梅毒的确诊依据,以其结果作参考,TPAB(ELISA)符合率为99. 30%,两者相关性较好,其中1例阴性经多次复查均阴性,无临床症状,排除梅毒可能。TPPA是将提纯的梅毒螺旋体(Nichd珠)抗原包被(致敏)鸡红细胞,遇血中存在的梅毒螺旋体抗体时,可出现肉眼可见的红细胞凝集反应。TPPA能排除各种非特异性反应,因此其敏感性和特异性较高,常作为梅毒的确证试验。验证非螺旋体试验阴性结果,特别适于潜伏梅毒及非螺旋体试验阴性而已高度怀疑梅毒者(先天性梅毒小儿母亲、梅毒患者配偶及其他性伴者等)。ELISA试剂的灵敏度优于TPPA,特异性优于TRUST, 3种方法中TRUST法的特异性最差。3种方法在特异性、敏感性上有一定的差异,其原因主要是采用的抗原度方法不同。TPPA作为确认实验,其缺陷是耗时太长,一般需2个小时才能出结果。
而ELISA仅需要1个小时就可以。TPAB(ELISA)法敏感性与特异性较之TRUST法均有所提高,有间接法、双抗原夹心法,适合大批量筛选。但也存在漏诊的风险,不宜作为梅毒的确认实验,正确的方法应该是结合TPPA法同时检测确诊梅毒病人才能做到不漏诊。TRUST法虽然易受人为因素影响,敏感性低,容易造成阳性漏检,但操作简便,出结果较快;经TPPA确认的142份阳性标本中,有1份为TRUST法检出,而ELISA方法未能检出,可能是抗体较弱的原因,ELISA法很难检测出。说明ELISA法尚不能完全取代TRUST法,而且TRUST法快速、简便,因此目前采用此法进行梅毒检测还是必要的。 TRUST法是利用心磷脂为抗原来检测梅毒抗体,在其梅毒初期或晚期梅毒病人血清可是假阴性,有时会出现前带现象,某些自身免疫性疾病可出现假阳性。本资料其阳性符合率仅占39. 44%。可能与住院病人年龄段分布、曾有冶游史有关。所以,我们认为如果以TRUST作为病人梅毒普查有不当之处,必然增加潜在医疗纠纷风险。临床检测中有必要作TPPA来为临床诊断提供依据。TPPA检测的特异性螺旋体抗体即使经治疗后也终生阳性,因此不能作为评价治疗效果、复发或再感染的指标。但TRUST检测的心磷脂抗体在感染梅毒3~4周可出现。此时TRUST可呈阳性。经治疗后,滴度可下降并转阴,如果经治疗2周后TRUST滴度维持在1：2以下,无临床症状,属血清固定。
因此,TRUST在临床上可帮助了解患者病情活动程度,作为判定复发或再感染指征,仍十分重要。TRUST滴度检测结果不可轻易放过。患者初检发病时间不足或用抗生素可延长阳性血清出现的潜伏期,特别是住院病人使用药物机会较多,所以必要时可在几天至2周内重复检查。当患者血清滴度升高4倍即需复治,对于高滴度者(大于1：8)应考虑为梅毒病人。因TRUST滴度与病情活动呈正相关,临床治疗后要作随访。TRUST滴度检测可作为判定复发或再感染指征。综上所述,我们认为住院病人有必要查TPPA来提高梅毒特异性,同时TRUST滴度分析作为疗效观察、判定复发或再感染指征。两者结合检测同时能加强梅毒监测,结合防治,做好早期发现,早期诊断,早期治疗,切断传染途径,有效控制梅毒流行。因此,临床应该同时检测非特异性抗类脂质抗体和特异性抗螺旋体抗体(TP-Ab)来确认梅毒。梅毒血清学检查是诊断梅毒的重要依据,但并非唯一依据,应综合分析梅毒血清学检测结果,排除假阳性、假阴性情况,才能做出正确的诊断。通过本实验统计数据及结果表明,实验室合理地选用上述3种不同检测方法进行梅毒检测,将减少漏诊、误诊,提高诊断率,为临床梅毒分期的确诊提供全面的参考依据,并且对判定梅毒的发展和痊愈、判断药物的疗效和防治性传播性疾病起到积极作用。
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