orz2011.4.04 发表于 2012-1-16 18:46

HIV-RNA假阳性的原因

检测HIV病毒 采用的基本上都是PCR技术这个技术的假阳性和影响的因素很多 ,所以一般不以检测病毒抗原为准 ,是以检查 抗体为准(仙翁说的原话)
PCR假阳性的原因:
一.整个基因组或大片段的交叉污染,导致假阳性。
对策:①操作时应小心轻柔,防止将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外。②除酶及不能耐高温的物质外,所有试剂或器材均应高压消毒。所用离心管及样进枪头等均应一次性使用。③必要时,在加标本前,反应管和试剂用紫外线照射,以破坏存在的核酸。
二.空气中的小片段核酸污染,这些小片段比靶序列短,但有一定的同源性。可互相拼接,与引物互补后,可扩增出PCR产物,而导致假阳性的产生。
对策:可用巢式PCR方法来减轻或消除。


liquorice 发表于 2012-1-16 20:11

呵呵,你这个理论性的东西太多,需要解释的东西太多,得从PCR谈起。但是PCR假阳还是很正常得。

要我说,不如再PCR完了,直接做个测序,妈的一看序列就知道是不是了,这样也就杜绝了非人为操作得假阳性得可能。也可以完全确诊了。

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